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關于胎牛血清的選擇及使用您知道嗎?
由于胎牛血清來源的特殊性,如何正確的選擇成了一個比較難的話題。那么如何來甄別和選擇血清,正確的使用血清,下面來看下BUNSEN本生技術小編的詳解?
1.看產地
受供體飼養(yǎng)環(huán)境、生產工藝等因素的影響,原產澳洲、新西蘭的血清是目前品質較高的血清來源。雖然北美洲的血清質量也較高,但受疫情及國家進口政策的限制,目前尚無正規(guī)渠道購買北美的血清產品。
2.看外觀
1)顏色:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清質量并無直接影響,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
2)澄清度:高質量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。
3)血清沉淀:血清有沉淀,是質量問題?血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,跟加工生產方式、是否反復凍融密切相關。雖然沉淀并不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3.看批間差異
采購血清要關注血清的批間差異。經驗豐富的供應商會制定嚴謹?shù)馁|檢標準,確保血清篩選標準的一致性,盡可能降低血清的批間差異,盡可能消除因采血、生產、貯藏工藝不同而造成的批間差異。
后,適合自己細胞生長的才是好的。
BUNSEN本生技術小編闡述——胎牛血清正確使用:
一、胎牛血清的功能
血清的成分十分復雜,既有協(xié)助物質運輸?shù)牡鞍?、營養(yǎng)物質,還有促進細胞生長的激素和因子等,正因為血清這種天然成分的復雜性,使得血清在細胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮了多種功能:
1.提供維持細胞生長的激素,促進所培養(yǎng)細胞的生長;
2.彌補基礎培養(yǎng)基中沒有或含量很少的營養(yǎng)物質;
3.提供結合蛋白,促進細胞識別和利用維生素、脂類和其他激素等;
4.某些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用;
5.促進細胞貼壁,提供可促進細胞鋪展在塑料培養(yǎng)基質的因子;
6.起酸堿度緩沖液作用;
7.提供蛋白酶抑制劑,使細胞消化時殘留的胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
二、胎牛血清有哪些重要的技術性指標?
1.內毒素:標準為不高于10EU/mL。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。
2.總蛋白含量:胎牛血清總蛋白含量一般范圍是30-50mg/mL,數(shù)值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。
3.血紅蛋白:標準為不高于30mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高。
4.pH:7.0~8.0。
5.微生物:包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。
6.免疫球蛋白(IgG):免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血時的牛齡情況,新生牛的血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清不含IgM,另外IgG的含量也較低。
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